مقايسات الزمن الحقيقي للتفاعل السلسلي للبوليميراز للتشخيص السريع لداء البروسيلات البشرية

يعتمد التشخيص المختبري لداء البروسيلات أساساً على أساليب سيرولوجية وطرق الزرع التي تعاني من نقص في تقييس مستحضرات المستضد ومنهجيات الفحص وداء البروسيلات هو أكثر ألأمراض البشرية الحيوانية المنشأ شيوعاً في جميع أنحاء العالم. وهو متوطن في كثير من المناطق، بما في ذلك أجزاء من إقليم منظمة الصحة العالمية لشرق المتوسط. وقد أظهرت دراسات عديدة أن تحليل تفاعل البوليميراز السلسلي التقليدي يمكن أن يوفر اختباراً سريعاً وحساساً ومحدداً بدلاً من السيرولوجيا والزرع لتشخيص داء البروسيلات..

استُخدِم تحليل تفاعل البوليميراز السلسلي التقليدي بشكل رئيسي في تشخيص داء البروسيلات الحاد، لكن لم يتم تقييم فائدته بالكامل في الحالات البؤرية والناكسة. ووجد الباحثون أن تفاعل البوليميراز السلسلي الحالي أكثر سرعة وقيل أكثر حساسية من تفاعل البوليميراز السلسلي التقليدي. ولا يتطلب معالجة منتجات تفاعل البوليميراز السلسلي ما بعد التضخيم، وبالتالي يقلل من خطر تلوث المختبر والنتائج الإيجابية الكاذبة.

في هذه الدراسة، تم تطوير ثلاثة فحوصات للكشف عن مسبار التهجين على جهازLightCycler وجرى مقارنة لاستهداف 16S-23S المنطقة الداخلية الفاصلة المنقولة ITS وترميز الجينات لـ omp25 وomp31 . وقد أظهرت جميع المقايسات حساسية للتحليل بدرجة 100% ونوعية بدرجة 100% عند اختبارها على 28 مستفردة إكلينيكية متتالية لنوع البروسيلة و 19 مستفردة إكلينيكية للعوامل الجرثومية الممرضة الإيجابية والسلبية لصبغة الغرام، على الترتيب.

وكانت مقايسات المنطقة الداخلية الفاصلة المنقولة هي الأكثر حساسية بحدود اكتشاف قدرها مكافئات اثنان للمجين لكل تفاعل سلسلي للبوليميراز. وجرى توثيق مصدوقية هذه المقايسة إكلينيكياً استباقياً من خلال 354 عينة (351 عينة دم كامل، وثلاث عينات لأنسجة مطمورة في البرافين) تم جمعها من 340 مريضاً، و 24 عينة من مرضى مصابين بسل نشط بما في ذلك حالتان ناكستان، و 31 حالة جرى علاجها من البروسيلة، و 299 مريضاً سلبي المصل عندما يشك مبدئياً في إصابته بداء البروسيلة.

وكانت قيمة الحساسية الإكلينيكية لمقايسة المنطقة الداخلية الفاصلة المنقولة 66.7%، والنوعية 99.7%، والقيم التنبؤية الإيجابية 94.1%، والقيم التنبؤية السلبية 97.6%، وبالمقارنة مع المزرعة التي كانت قيمها 77%، 100%، 100%، 97.3% بالترتيب. ولم يكن هناك فارق يعتد بها إحصائياً في الحساسية بين المزرعة ومقايسة المنطقة الداخلية الفاصلة المنقولة (قيمة الاحتمال p= 0.71). وكانت كلتا الحالتين الناكستين إيجابيتين للتفاعل السلسلي للبوليميراز. وكان المرضى المعالجين سلبيين للتفاعل السلسلي للبوليميراز. وكانت جميع المقايسات الثلاثة لعينات الأنسجة إيجابية، ولكن لم تكتشف مقايسة omp25 و omp31الحمض النووي دنا من نوع البروسيلة في عينات الدم. لأن omp31 غير موجود في البروسيلة المجهضة، وتدل هذه المعطيات على أن المستفردات الثمانية والعشرين هي على الأرجح بروسيلة مالطية. إن مقايسة المنطقة الداخلية الفاصلة المنقولة لتفاعل البوليميراز السلسلي سريعة ويمكن أن تزيد من القدرة على التشخيص المختبري للبروسيلة البشرية.

استشهاد: ميراي م. قطار وآخرون. تطوير وتقييم الوقت الحقيقي لتحليلات تفاعل البوليميراز السلسلي المجراة على كامل الدم والأنسجة المطمورة بالبرافين لسرعة تشخيص داء البروسيلات البشري، التشخيص الميكروبيولوجي والأمراض المعدية، 2007، 23 : 32, |PubMed|

لقد جرى دعم هذه ا لدراسة تقنياً ومالياً من مخطط المنح الصغيرة لبرنامج البحوث والتدريب في مجال أمراض المناطق المدارية التابع للمكتب الإقليمي لمنظمة الصحة العالمية لشرق المتوسط.